一种高产丁醇的重组菌株及其构建方法。该方法是将目的片段与表达载体相连得到重组表达质粒，然后将重组表达质粒转化进入丙酮丁醇梭菌中，从而得到高产丁醇的重组菌株；所述的目的片段为表达盒EC或丁醇脱氢酶基因bdh；或表达盒EC、丁醇脱氢酶基因bdh和操纵子Sol中两者或三者的结合；所述的表达盒EC，其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；所述的操纵子Sol，其核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示；所述的丁醇脱氢酶基因bdh，其核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示。本发明重组菌株能够表达丁醇产生菌丁醇生物合成基因编码的丁醇生物合成酶，从而使丁醇生物合成酶的活性提高，菌株的代谢强度得到提高，丁醇的产量和转化率可得到进一步提高，有利于丁醇的工业化生产。

本发明重组菌株能够表达丁醇产生菌丁醇生物合成基因编码的丁醇生物合成酶，从而使丁醇生物合成酶的活性提高，菌株的代谢强度得到提高，丁醇的产量和转化率可得到进一步提高，有利于丁醇的工业化生产。